核酸內(nèi)切酶是一種在特殊核甘酸序列處水解雙鏈DNA的內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶的特異性有兩方面,一是識(shí)別特定的核苷酸序列,另一方面在特定的位點(diǎn)切割DNA分子,它是基因工程中的工具。
核酸內(nèi)切酶到底是什么?
它是一組酶,它們切割存在于多核苷酸鏈中的磷酸二酯鍵。
內(nèi)切核酸酶能夠從鏈的中間斷開(kāi)鍵。
這些酶對(duì)被切割的序列具有特異性或非特異性。對(duì)特定序列具有特異性的核酸內(nèi)切酶稱為限制性核酸內(nèi)切酶。
限制性從各種細(xì)菌和古生菌中獲得,每一種都對(duì)多核苷酸鏈中的不同位點(diǎn)具有特異性。
切割的序列形成單鏈末端,也稱為粘性末端,然后通過(guò)DNA連接酶進(jìn)行雜交。產(chǎn)生的DNA稱為重組DNA,該過(guò)程稱為重組。
限制性是重要的核酸內(nèi)切酶組之一,根據(jù)其作用機(jī)制分為三類。
限制性在其作用之前可能會(huì)經(jīng)歷一段滯后期。這種滯后期可能是由于識(shí)別特定站點(diǎn)所需的時(shí)間。
因?yàn)闀?huì)在中間切割DNA片段,所以會(huì)產(chǎn)生寡核苷酸。
一些核酸內(nèi)切酶具有防御功能,可以防止某些病原體進(jìn)入。
是在大約1000個(gè)堿基對(duì)的隨機(jī)位點(diǎn)切割的大型多亞基復(fù)合物。II型核酸內(nèi)切酶是在沒(méi)有ATP的情況下切割序列的較小亞基。III型核酸內(nèi)切酶也很復(fù)雜,可切割25個(gè)堿基對(duì)的序列。
可以切割雙鏈DNA、單鏈DNA甚至RNA。
這些酶對(duì)于DNA修復(fù)至關(guān)重要,因?yàn)樗鼈兛梢跃_地識(shí)別和切割受損的DNA。
這可以防止不必要的切割和其他酶可能發(fā)生的進(jìn)一步損害。